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田鼠分枝桿菌PCR檢測試劑盒反應五要素
點擊次數:744 更新時間:2021-03-30

田鼠分枝桿菌PCR檢測試劑盒反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

犬血栓素B2(TXB2)elisa檢測試劑盒
犬血栓前體蛋白(TpP)elisa檢測試劑盒
犬血栓調節蛋白(TM)elisa檢測試劑盒
犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)elisa檢測試劑盒
犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa檢測試劑盒
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)elisa檢測試劑盒
犬血管緊張素轉化酶2(ACE2)elisa檢測試劑盒
犬血管緊張素轉化酶(ACE)elisa檢測試劑盒
犬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa檢測試劑盒
犬血管緊張素-7(Ang-7)elisa檢測試劑盒
犬α(Thymosin α)elisa檢測試劑盒
犬胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)elisa檢測試劑盒
犬胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL7)elisa檢測試劑盒
犬心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)elisa檢測試劑盒
犬心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)elisa檢測試劑盒
犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa檢測試劑盒
犬纖溶酶原激活物抑制劑(SERPINE)elisa檢測試劑盒
犬細小病毒(PV)抗體(IgG)elisa檢測試劑盒
犬細胞間粘附分子(ICAM-/CD54)elisa檢測試劑盒

 

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