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小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格

小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱:  Acta2/Actsa/Actvs ELISA kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

酚    英文名稱:    Kaempferol    :    520-8-3    分子式:    286.2363    分子量:    C5H0O6
酚紅鈉    英文名稱:    Phenolsodium    :    34487-6-    分子式:    376.36    分子量:    C9H3NaO5S
酚硫殺    英文名稱:    Phenolsulfur    :    2539-90-8    分子式:    244.74    分子量:    CH3ClO2S
酚葡萄糖醛苷    英文名稱:    Kaempferolglucuronide    :    22688-78-4    分子式:    462.36042    分子量:    C2H8O2
    英文名稱:    Phenolphthalein    :    77-09-8-    分子式:    38.33    分子量:    C20H4O4
標準溶液    英文名稱:    Phenolphthaleinstandardsolution    :    977/9/8    分子式:    38.33    分子量:    C20H4O4
單磷二環己胺鹽    英文名稱:    Phenolphthaleinmonophosphatedicyclohexylaminesalt    :    485-59-9    分子式:    596.65    分子量:    C20H5O7P·2C6H
絡合劑    英文名稱:    Phenolphthalexone    :    25296-54-2    分子式:    608.55    分子量:    C30H28N2O2
酚紫    英文名稱:    Phenolviolet    :        分子式:        分子量:    
粉防已堿    英文名稱:    Powderantialkali    :        分子式:        分子量:    
粉唑    英文名稱:    Flutriafol    :    76674-2-0    分子式:    30.29    分子量:    C6H3F2N3O組蛋白 3. 小鼠單抗    30μL    
臺盼藍    5g    
90602G-50    DNA 電泳分子量標準 (3)pBR322/BstN I    50 次
2030-000    T7 RNA 聚合酶    000U
822B-30    一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)    30 次
3002-0    AP 標記的抗抗體    0μL
CAS5086-94-9    伊紅 Y, 醇溶性    0g
小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶聯免疫elisa試劑盒規格克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成試劑盒    0 次    
CAS606-2-4    琥珀酸,六水    25g
7-0050    EcoRI    2000U
F2K 液體培養基 ( 無血清和雙抗 )    500mL    
非凍型拭子 DNA 保存液 A( 無拭子 )     00mL    
COX IV 小鼠單抗    00 μL    
酵母蛋白酶抑制劑    mL    
DNA 上樣液 ( 紅 ),6×    0mL    
DNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )    00g    

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