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小鼠白喉IgG抗體酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠白喉IgG抗體酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠白喉IgG抗體酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠白喉IgG抗體酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱:Mouse Diphtheria IgG antibody ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

異丁納    英文名稱:    ISObutyrate    :    996-30-5    分子式:        分子量:    
    分子式:    230.3    分子量:    C4H8N2O    英文名稱:    Thespecial    :    50847--5
異丁酸鉀    分子式:    26.2    分子量:    C4H7KO2    英文名稱:    Potassiumbutyrate    :    9455-20-0
異丁酰    分子式:    02.4    分子量:    C4H0N2O    英文名稱:    Isobutylhydrazine    :    369-7-8
異丁鹽酸鹽    分子式:        分子量:    C4H3ClN2    英文名稱:    Isobutylhydrazinehydrochloride    :    237064-47-0
異惡唑    分子式:    69.06    分子量:    C3H3NO    英文名稱:    Isoxazole    :    288-4-2
異惡唑草酮    英文名稱:    Isoxazoleclomazone    :    42-29-0    分子式:    359.32    分子量:    C5H2F3NO4S
異葒草苷    英文名稱:    Isoorientin    :        分子式:        分子量:    
異茴芹內(nèi)酯    英文名稱:    Isopimpinellin    :    482-27-9    分子式:    246.22    分子量:    C3H0O5
異己    英文名稱:    Isocaproate    :    646-07-    分子式:    6.6    分子量:    C6H2O2
異喹啉    分子式:    29.6    分子量:    C9H7N    英文名稱:    ISO    :    9-65-3
異李素    英文名稱:    Isorhamnetin    :    480-9-3    分子式:    36.26    分子量:    C6H2O7
異蓮心堿    英文名稱:    Isoliensinine    :    687-4-0    分子式:    60.739    分子量:    C37H42N2O6
異硫玫理紅B    英文名稱:    TheredroseandBisothiocyanate    :    8687    分子式:        分子量:    
異硫熒光素(FITC)    英文名稱:    Fluoresceinisocyanate(FITC)    :    27072-45-3    分子式:    389.38    分子量:    C2HNO5S
異硫熒光素(FITC-I)    英文名稱:    Fluoresceinisocyanate(FITC-I)    :    3326-32-7    分子式:    389.39    分子量:    C2HNO5S植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑 (2DE)     00 次    
GSH 試劑盒 ( 測試盒 )( 比色法 )    50 T    
96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )    5次    
藍(lán)膠瓊脂糖    50mL    
膽酸    5g    
半纖維素酶    5ku    
幾丁質(zhì)    0g    
柱式 RNA 純化試劑盒    50 次    
羧芐青溶液 ,50mg/mL    mL    
硫酸鏈    5g    
7002-00    凝固血液 DNAout    00 次
3080-    重組蛋白 G    mg
6060-3    DNA UV 防護(hù)劑    3g
柱式血液 DNAout    50 次    
30663-00    T4 噬菌體基因 32 蛋白    00μg 
CAS26305-03-3    抑制劑    5mg
30836-250    Red-Tth DNA 聚合酶    250U

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